•La cromatografia può essere utilizzata sia per l’analisi qualitativa che quantitativa. Principi di cromatografia.
La cromatografia separa i componenti in una miscela.
Un campione della miscela può essere sciolto in un solvente. La fase mobile è il liquido o il gas che trasporta il campione in avanti e passa sopra un materiale solido, chiamato fase stazionaria.
La separazione si verifica a causa delle diverse capacità dei componenti di assorbire o desorbire (dissolversi di nuovo in) la fase mobile. Più fortemente un componente si lega alla fase stazionaria, più lenta è la velocità di movimento di quel componente sulla fase stazionaria.
Tecniche di cromatografia:
Esistono diversi tipi di cromatografia:
* cromatografia su carta
* cromatografia su strato sottile(TLC)
•cromatografia su colonna, gascromatografia (GC)
•cromatografia liquida ad alte prestazioni (HPLC).
Cromatografia della carta
La carta assorbente di alta qualità viene utilizzata come fase stazionaria. Una soluzione del campione è composta e un punto molto piccolo è disposto su un’estremità della carta con un tubo capillare. La posizione del punto è chiamata origine. La carta viene quindi posta in un contenitore in modo che il bordo della carta sotto il punto sia immerso in un solvente. Quando il solvente (fase mobile) sale sulla carta, i componenti di ciascun campione si separano.
Cromatografia a strato sottile •Carta e TLC sono utili per l’analisi qualitativa.
Interpretazione dei cromatogrammi
Un cromatogramma è il modello di bande o macchie formate sul piatto o sulla carta.
Le singole sostanze chimiche possono essere determinate da:
1. Esecuzione di standard noti sullo stesso cromatogramma dell’ignoto e confronto
•In questo metodo è necessario avere un’idea della sostanza chimica presente nel campione
•Il campione e lo standard devono essere eseguiti sullo stesso cromatogramma perché le distanze spostate dall’origine dipenderanno dalla distanza spostata dal fronte del solvente.
2. Calcolo dei valori Rf del campione.
Valori Rf
Il valore Rf dei componenti di una miscela è la distanza percorsa lungo la fase stazionaria rispetto alla distanza percorsa dal fronte solvente.
•Rf = Distanza spostata dall’origine per componente
Distanza spostata dall’origine per solvente
•I valori Rf sono sempre inferiori a uno.