•chromatografie může být použita jak pro kvalitativní, tak pro kvantitativní analýzu.
•může být použit k identifikaci mnoha anorganických a organických látek, jako jsou léky přítomné v krvi a toxické plyny ve vzduchu.
principy chromatografie.
chromatografie odděluje složky ve směsi.
vzorek směsi může být rozpuštěn v rozpouštědle. Mobilní fáze je kapalina nebo plyn, který přenáší vzorek dopředu a prochází přes pevný materiál, nazývaný stacionární fáze.
k separaci dochází v důsledku rozdílných schopností složek adsorbovat nebo desorbovat (rozpouštět zpět do) mobilní fáze. Čím silněji se složka váže ke stacionární fázi, tím pomalejší je rychlost pohybu této složky po stacionární fázi.
techniky chromatografie:
existuje řada různých typů chromatografie:
* papírová chromatografie
* tenkovrstvá chromatografie (TLC)
* sloupcová chromatografie, plynová chromatografie (GC)
* vysoce výkonná kapalinová chromatografie (HPLC)•
papírová chromatografie
jako stacionární fáze se používá vysoce kvalitní absorpční papír. Vytvoří se roztok vzorku a na jeden konec papíru se kapilární trubicí umístí velmi malá skvrna. Poloha místa se nazývá původ. Papír se pak umístí do nádoby tak, aby okraj papíru pod bodem byl ponořen do rozpouštědla. Jak rozpouštědlo (mobilní fáze) stoupá na papír, složky každého vzorku se oddělují.
tenkovrstvá chromatografie
* podobně jako papírová chromatografie s výjimkou stacionární fáze je jemný prášek, jako je oxid hlinitý, rozprostřený na skleněné nebo plastové desce.
* papír a TLC jsou užitečné pro kvalitativní analýzu.
interpretace chromatogramů
chromatogram je vzor pásů nebo skvrn vytvořených na desce nebo papíru.
jednotlivé chemické látky lze určit buď pomocí:
1. Běh známých standardů na stejném chromatogramu jako neznámý a porovnání
•při této metodě je nutné mít určitou představu o chemické látce přítomné ve vzorku
* vzorek a norma musí být spuštěny na stejném chromatogramu, protože vzdálenosti posunuté od původu budou záviset na vzdálenosti posunuté přední stranou rozpouštědla.
2. Výpočet Rf hodnot vzorku.
hodnoty Rf
hodnota Rf složek směsi je vzdálenost, kterou urazí po stacionární fázi ve srovnání se vzdáleností ujetou přední částí rozpouštědla.
* Rf = vzdálenost přesunutá od původu komponentou
vzdálenost přesunutá od původu rozpouštědlem
* hodnoty Rf jsou vždy menší než jedna.