•kromatografi kan användas för både kvalitativ och kvantitativ analys.principer för kromatografi.
kromatografi separerar komponenterna i en blandning.
ett prov av blandningen kan lösas i ett lösningsmedel. Den mobila fasen är vätskan eller gasen som bär provet framåt, och det passerar över ett fast material, kallat den stationära fasen.
Separation sker som ett resultat av komponenternas olika förmågor att adsorbera eller desorbera (lösa upp i) mobilfasen. Ju starkare en komponent binds till den stationära fasen, desto långsammare rörelsehastighet för den komponenten över den stationära fasen.
Kromatografitekniker:
det finns ett antal olika typer av kromatografi:
• papperskromatografi
•tunnskiktskromatografi (TLC)
•kolonnkromatografi, gaskromatografi (GC)
•högpresterande vätskekromatografi (HPLC).
Papperskromatografi
absorberande papper av hög kvalitet används som stationär fas. En lösning av provet består och en mycket liten fläck placeras på ena änden av papperet med ett kapillärrör. Platsen för platsen kallas ursprunget. Papperet placeras sedan i en behållare så att kanten på papperet under platsen är nedsänkt i ett lösningsmedel. När lösningsmedlet (mobilfasen) stiger upp papperet separeras komponenterna i varje prov.
tunnskiktskromatografi
•liknar papperskromatografi utom den stationära fasen är ett fint pulver som aluminiumoxid spridd på en glas-eller plastplatta.
•papper och TLC är användbara för kvalitativ analys.
tolkning av kromatogram
ett kromatogram är mönstret av band eller fläckar som bildas på plattan eller papperet.
enskilda kemikalier kan antingen bestämmas av:
1. Kör kända standarder på samma kromatogram som det okända och jämför
•i denna metod är det nödvändigt att ha en uppfattning om kemikalien som finns i provet
•provet och standarden måste köras på samma kromatogram eftersom avstånden som flyttas från ursprunget beror på avståndet som flyttas av lösningsmedelsfronten.
2. Beräkning av Rf-värden för provet.
Rf-värden
Rf-värdet för komponenter i en blandning är avståndet de färdas längs den stationära fasen jämfört med avståndet som reste av lösningsmedelsfronten.
•Rf = avstånd flyttat från ursprung efter komponent
avstånd flyttat från ursprung med lösningsmedel
•Rf-värden är alltid mindre än en.